红花bZIP20转录因子基因的克隆、表达分析及植物表达载体构建

目的 克隆红花花瓣中bZIP20(Basic region/leucine zipper motif)基因,研究其在不同组织中的表达量并构建其植物表达载体。方法 根据红花转录组测序结果挑选bZIP基因的设计引物,以红花花瓣总RNA为模板,采用RT-PCR法扩增bZIP20基因开放阅读框(ORF)片段,利用RT-PCR法分析在红花不同组织以及尖孢镰刀菌侵染后红花根部bZIP20基因的表达量,同时构建植物表达载体pBASTA-bZIP20。结果 bZIP20基因ORF长981 bp,编码326个氨基酸(GenBank登录号为KT692605)。红花bZIP20与其他物种氨基酸具有一定的同源性,其与芝麻、野茶树的氨基酸序列相似性高达85.41%和83.99%。实时荧光定量PCR分析表明,bZIP20基因在不同组织中的表达水平具有显著差异,在花中呈现高表达,而在其他组织中低表达。接种尖孢镰刀菌的红花根部组织中bZIP20基因的表达显著上调。结论 成功地对bZIP20基因进行克隆及表达分析,并构建植物表达载体pBASTA-bZIP20