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ISSN: 2333-9721
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制备禽致病性大肠杆菌菌蜕的三种方法比较

DOI: 10.13345/j.cjb.170089

Keywords: 裂解基因E,菌蜕,细胞穿透肽,禽致病性大肠杆菌

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Abstract:

菌蜕 (Bacterial ghosts) 是一种只含有细菌内、外膜结构的细菌空壳,可作为新型疫苗和传递载体。本研究通过3种方式制备禽致病性大肠杆菌 (Avian pathogenicity Escherichia coli,APEC) 分离株DE17的菌蜕,评价不同的菌蜕制备方法。结果表明,利用噬菌体PhiX174的裂解基因E构建的溶菌质粒pBV220-E制备DE17菌蜕,对DE17菌株裂解率可达99.9%,扫描电镜观测结果表明,在DE17两端或中部形成可见的跨膜孔道,呈现典型的菌蜕结构。利用合成的细胞穿透肽MAP (KLALKLALKALKAALKLA) 作用于DE17制备菌蜕,结果表明,10 μmol/L的MAP可实现对OD600=0.1的DE17完全灭活,扫描电镜虽未看到明显的跨膜孔道,但细菌的膜结构呈现沟壑状,而构建的可表达MAP的溶菌质粒pBV220-MAP并不能实现对DE17的裂解作用。本研究通过比较分析不同APEC菌蜕的制备方式,为进一步研究菌蜕疫苗和提高菌蜕疫苗的生物安全性提供参考

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