甲醇毕赤酵母Pichia methanolica的高效电转化方法

摘要 采用电穿孔的方法对甲醇毕赤酵母进行外源DNA的转化.通过调整参数,对影响电转化效率的主要因素进行探索,建立了质粒pMETA-Lip对甲醇毕赤酵母PMAD16的高效电转化方法.结果表明,当采用对数生长中期的菌体制备感受态细胞、质粒DNA浓度为30μg/mL、采用0.2cm电转杯、电压为600V时,转化率达到最大值,为57个转化子/μg质粒DNA.经抽样鉴定所得到的转化子均为阳性克隆.为外源基因在甲醇毕赤酵母中的表达奠定了基础