利用FPLC技术建立重组碱性蛋白酶的快速纯化方案

摘要 在构建了以地衣芽孢杆菌为宿主的产碱性蛋白酶的工程菌BA071以后,为了给探索重组酶的性质及其稳定性奠定基础,利用快速蛋白液相层析(FPLC)技术,建立了快速高效纯化碱性蛋白酶的方案.发酵液通过硫酸氨沉淀、DEAE-A-50脱色及聚乙二醇浓缩得粗酶,再经过CM-Sephadex-C-50、Sephadex-G-75柱层析后较好地得到了单一组份的重组碱性蛋白酶,酶纯度提高了76.2倍.SDS-PAGE显示重组碱性蛋白酶分子质量为28·#ku