橙皮素单葡萄糖苷的酶法生物合成与定向调控

摘要 采用高效液相色谱法(HPLC)测定橙皮苷酶的酶学性质，并探讨其催化橙皮苷转化为橙皮素单葡萄糖苷(hesperetin-7-O-glucoside, HMG)的反应历程与定向调控。结果表明：橙皮苷酶在20～70 ℃、pH 3.0～7.0具有较好的稳定性，且最适反应温度为60 ℃，最适反应pH值为4.0；在最适反应温度和pH下，该酶的动力学常数Km为296.69 μg/mL，最大反应速率Vm为0.872 3 μg/(mL·min)；与HMG转化相关的关键酶α-L-鼠李糖苷酶的Km为232.58 μg/mL，Vm为0.397 9 μg/(mL·min)；在60 ℃、pH 4.0，酶用量为15.35 U、增溶剂添加量为0.8%、葡萄糖添加量为3 mg/mL、酶解时间为3 h时，酶反应向有利于HMG转化的方向进行，此时HMG得率为35.8%