基于免疫磁珠的胶体金免疫层析法同时检测猪肉中3-甲基-喹噁啉-2-羧酸和喹噁啉-2-羧酸

摘要 该研究建立一种基于免疫磁珠分离、净化和富集的快速、灵敏的胶体金免疫层析同时检测猪肉中的3-甲基-喹噁啉-2-羧酸(3-methylquinoxaline-2-carboxylic acid,MQCA)和喹噁啉-2-羧酸(quinoxaline-2-carboxylic acid,QCA)残留的方法。利用免疫磁珠快速提取猪肉中的MQCA和QCA,磁场快速分离,加热洗脱并富集,然后用胶体金免疫层析法检测,可在5 min内完成,MQCA定性和定量检测限均为0.1 μg/kg(QCA定性和定量检测限均为0.25 μg/kg)。结果表明,经过优化后试纸条最佳工艺为抗体标记浓度2.5 mg/mL,抗原(T线)划膜浓度1.2 mg/mL,羊抗鼠二抗(C线)划膜浓度1.0 mg/mL,制备免疫磁珠时亲和素磁珠与抗体最佳偶联量为40 μg/mg,MQCA和QCA样本添加浓度分别为0.1、0.5、2和0.25、1.25、5 μg/kg,回收率为89.9%~115.2%,变异系数为6.8%~11.5%。用基于免疫磁珠的胶体金免疫层析法和液相色谱-质谱/质谱技术(liquid chromatography-tandem mass spectrometry, LC-MS/MS)同时对20个市售猪肉样本检测,一致性较好,证明胶体金免疫检测方法可以用于实际猪肉样本中MQCA和QCA的快速定性和定量检测