液相色谱串联质谱检测牙鲆鱼中的小清蛋白过敏原

摘要 以合成肽段ALTDAETK为定量特征肽段,SDFIEEDELK及LFLQNFAFSASAR为定性肽段,建立牙鲆中小清蛋白高效液相色谱-串联质谱的检测方法。同时对蛋白提取液、碘代乙酰胺浓度、酶/蛋白质比例、酶解时间在内的前处理条件和肽段质谱参数条件进行了优化。结果显示,ALTDAETK肽段在0.005~10 mg/L线性关系良好(R2>0.999),小清蛋白定量限 2.74 mg/kg;以大菱鲆为空白基质,重组小清蛋白的平均回收率为95%～102%,相对标准偏差(RSD )小于7%,重复性好。该文首次实现了用HPLC-MS/MS方法精确定量检测牙鲆中主要过敏原PV