产β-葡萄糖苷酶菌株的筛选及产酶条件优化

摘要 为开发新型高产β-葡萄糖苷酶的微生物菌种资源,本实验从腐木中分离获得1株产β-葡萄糖苷酶的青霉菌株L1;经等离子-硫酸二乙酯复合诱变后,利用七叶苷平板法初筛,摇瓶发酵复筛,最终获得1株可稳定遗传的突变菌株D-6,经单因素试验、Plackett-Burman试验、最陡爬坡试验和响应面试验确定了其发酵产酶最佳条件。结果表明,最佳产酶条件是:KH2PO4 6 g/L、MgSO4·7H2O 1 g/L、CaCl2 0.5 g/L、FeSO4 0.1 g/L,初始pH 5.2,接种量5%(孢子浓度108个/mL),碳源添加量(X1) 玉米秸秆45.74 g/L、氮源添加量(X2) (NH4)2SO4 7.23 g/L、装液量(X5) 63 mL/250 mL,发酵温度28 ℃,摇床转速160 r/min,发酵时间132 h,D-6菌株的β-葡萄糖苷酶活力为142.92 U/mL,较出发菌株L1提高了274.4%。研究结果为产β-葡萄糖苷酶菌株发酵条件优化提供技术参考,同时为该类菌株的开发和应用提供有效的菌种资源