利用代谢工程构建高产乙偶姻枯草芽孢杆菌

摘要 乙偶姻是枯草芽孢杆菌的主要胞外产物,在代谢工程育种中,阻断目标产物的降解途径或加强目标产物前体物的代谢通量是有效提高目的产物积累量的重要手段.该研究克隆了来自枯草芽孢杆菌JNA 3-10的α-乙酰乳酸合成酶(ALS)和α-乙酰乳酸脱羧酶(ALDC)基因alsS和alsD.在大肠杆菌BL21中分别对ALS和AL-DC进行表达、纯化和初步的酶学性质研究,随后将ALS、ALDC、ALS+ ALDC分别在乙偶姻还原酶敲除菌株(BM)中进行过量表达,发现3株重组菌株的乙偶姻产量与BM菌株相比分别提高了5.2％、4.1％和10.8％,最终乙偶姻产量达到53.5 g/L,生产效率为0.50 g/(L· h)