乳酸脱氢酶突变体D-LDHY52L在大肠杆菌中的重组表达及其合成D-苯基乳酸的研究

摘要 Lactobacillus pentosus D-乳酸脱氢酶的三维构象表明氨基酸序列中第52位的酪氨酸非常接近底物酮酸盐C3位上的基团.该研究利用定点突变技术将第52位的亲水性的酪氨酸替换成疏水性的亮氨酸,有效提高了D-乳酸脱氢酶对底物苯丙酮酸的催化活力.在大肠杆菌中重组表达后,利用重组菌全细胞转化苯丙酮酸合成D-苯基乳酸.结果表明,D-苯基乳酸的产量比未突变菌株提高了46％,产量达18.47 g/L,转化率达65.96％