枯草芽孢杆菌PNG27生产凝乳酶的发酵工艺优化及分离纯化研究

摘要 通过单因素试验、Plackett-Burman试验设计、Box-Behnken响应面试验设计对培养基成分及发酵条件进行了优化,使最终发酵液凝乳酶活力达到222.34±4.99 U/mL.采用乙醇分级沉淀、DEAE-纤维素离子交换柱层析和Sephadex G-100分子筛等分离手段对枯草芽孢杆菌PNG27凝乳酶进行分离纯化,得到电泳纯的凝乳酶.结果表明,酶的比活力达到794.30 U/mg,纯化倍数为8.29倍,最终回收率为4.25％,SDS-PAGE电泳分析凝乳酶分子质量约为42 kDa