PCR法检测耐热耐酸菌条件的优化

摘要 以耐热菌为研究对象,对PCR法快速检测耐热菌的扩增条件:Taq酶浓度、Mg2+浓度、退火温度、循环温度/时间、循环次数5个方面进行了优化.最终得到PCR反应最佳条件:50μL扩增体系中,Taq酶浓度2 U/mL、Mg2+浓度2.0mmol/L、退火温度58℃.扩增程序:94℃预变性4min后进入PCR循环,即94℃/30S-58℃/30S-72℃/30S,循环35次,72℃下延伸5min