高效液相色谱法测定蛋白核小球藻中的叶黄素

摘要 采用反相高效液相色谱法(RP-HPLC)分离测定了蛋白核小球藻中的叶黄素.样品制备采用甲醇-二氯甲烷(体积比为2∶1)混合溶剂为叶黄素提取剂,所用色谱柱为Nova-Pak(R)C18不锈钢柱,以甲醇-乙腈-水(体积比为80∶10∶10)和甲醇-乙腈(体积比为40∶60)为流动相,线性梯度洗脱,流速0.8 mL/min,在447 nm下用光电二极管阵列检测器(DAD)检测.测定结果显示,在0～60 mg/L范围内,标准曲线呈良好的线性关系(r=0.9999),叶黄素的保留时间为11.25 min,浓度的相对标准偏差为0.49%(n=6),平均加样回收率为99.7%.该法简单、快速、准确