极耐热内切葡聚糖酶Cel 12B的高效表达

摘要 海栖热袍菌Thermotoga maritima是嗜极端高温的厌氧细菌,其产生的极耐热葡聚糖酶具有很好的热稳定性和潜在的可观工业用途.但嗜高温菌基因在大肠杆菌中表达水平较低,T.m内切葡聚糖酶Cel12B基因带有信号肽,应用在线预测分析,通过PCR方法分别克隆Cel12B完整基因和不带信号肽基因至pET-20b载体,构建重组质粒pET-20b-Cel12B和pET-20b-Cel12B-WS,转化至大肠杆菌JM109DE3诱导表达后,分析酶活,结果表明去除信号肽重组菌单位酶活是未去除信号肽重组菌11倍多