中温α-淀粉酶基因在枯草芽孢杆菌中的高效表达及其发酵条件优化

摘要 以枯草芽孢杆菌为表达系统,以中温α-淀粉酶为目标蛋白,研究了启动子和信号肽对外源蛋白表达分泌的影响.分别选取了4种启动子以及8种信号肽来进行筛选,结果表明,启动子PAprE的强度最高,信号肽SPnprE的分泌效率最好.针对重组菌株1A751Q31进行系统的发酵优化,在72h发酵液中α-淀粉酶酶活达到380U/mL.在7.5L发酵罐中进行放大实验,发酵液中α-淀粉酶酶活最高达到853 U/mL.以上研究表明,α-淀粉酶适合在枯草芽孢杆菌中进行表达,同时表明枯草芽孢杆菌是良好的异源蛋白表达系统