马奶酒样乳杆菌乳糖酶LacZ基因的克隆,原核表达及活性分析

摘要 从开菲尔粒(Kefir)中分离出1株马奶酒样乳杆菌(Lactobacillus kefiranofaciens ZW3),具有较高的乳糖酶活性,以此菌株为材料,从其基因组中克隆得到LacZ型乳糖酶基因,该基因全长2007 bp,编码669个氨基酸.随后将该基因插入原核表达载体pET-32a中转入大肠杆菌BL21(DE3)进行过量表达,获得了其重组蛋白,纯化后分析了该重组蛋白的乳糖水解活性特点.结果显示,此蛋白在50℃,pH 7.0时乳糖水解活力最高,并在30 ～55℃,pH 5.O～9.0的范围仍能保持50％以上的酶活力,具有良好的工业应用潜力