中性蛋白酶基因在大肠杆菌中诱导表达条件的研究

摘要 采用PCR方法从枯草芽孢杆菌中扩增得到中性蛋白酶基因npr,与表达载体pE-22b(+)连接构建成重组质粒pET22b-npr,转化大肠杆菌BL21得到重组工程菌株.经IPTG诱导,其所含有的中性蛋白酶基因可高效表达.研究不同的表达条件对中性蛋白酶表达水平的影响,发现当培养液的OD600值达到0.6～0.8时,添加诱导剂IPTG至终浓度为0.8 mmol/L,28℃诱导7 h,重组工程菌中性蛋白酶的表达量最高,SDS-PAGE电泳结果显示出明显的分子质量约43 ku的特异性蛋白条带