嗜热栖热菌海藻糖合酶的分子改造及其应用

摘要 对前期获得的Thermus thermophilus海藻糖合酶进行了分子改造以提升其催化制备海藻糖的性能.利用定点突变技术,将第251位Pro突变为Leu,得到突变体P251L,并于E.coli BL21(DE3)中重组表达,重组菌在摇瓶中发酵酶活为6.9 U/mL.以突变体催化制备海藻糖的研究表明,当以0.3 g/mL麦芽糖为底物,初始反应pH为7.5,温度为50℃,加酶量为20 U/g麦芽糖时,转化率达到最高值62.0％,比天然酶高出13.0％