点突变H125L和E145A对L-天冬酰胺酶酶活和热稳定性的改善

摘要 L-天冬酰胺酶可以催化L-天冬酰胺转化为L-天冬氨酸和氨.目前,已被广泛应用于食品和医药行业,但是由于低酶活、稳定性差等缺陷限制了该酶的应用.研究通过理性设计选择了7个位点进行点突变,以提高来源于Bacillus subtilis B11-06的L-天冬酰胺酶(BsAII)的酶活和热稳定性.酶活测定结果表明,突变体酶H125Lansz、E145Aansz、H125L-E145Aansz的酶活较BsAII分别提高36％、48％和64％,突变体酶E74Gansz酶活为BSAII的35.73％,H139ansz酶活几乎为0,其余突变体酶酶活较BSAII均有所降低.其中H125Lansz在40℃的半衰时间较BSAII延长3.9h.研究表明,第125和145位氨基酸残基对酶的催化作用和蛋白结构的稳定性有较大影响,为其他来源L-天冬酰胺酶的改造提供了理论依据,并提高了该酶的工业应用潜力