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- 2019
脱乙酰基酶在枯草芽孢杆菌中的高效可溶性表达DOI: 10.13995/j.cnki.11-1802/ts.021023 Keywords: 脱乙酰基酶,可溶性表达,枯草芽孢杆菌,过量表达 Abstract: 摘要 为提高脱乙酰基酶的可溶性表达含量,对前期挖掘的脱乙酰基酶NAP-Das2.3基因进行异源表达及发酵优化。将脱乙酰基酶NAP-Das2.3基因克隆至枯草芽孢杆菌表达载体pP43NMK的nprB信号肽下游,转入B. subtilis WB800构建了重组工程菌B. subtilis WB800/pP43NMK/nap-das2.3,并对重组菌培养及发酵产酶条件进行了优化。重组菌最适培养和产酶条件分别为甘油6 g/L、牛肉膏30 g/L、NaCl 10 g/L;pH 7.5、培养温度37 ℃、装液量100 mL (500 mL摇瓶)、培养30 h。在优化的条件下,发酵液中脱乙酰基酶酶活达到106.42 U/L,较出发条件提高了424.68倍,在5 L发酵罐培养30 h后,脱乙酰基酶酶活达到116.13 U/L。研究实现了脱乙酰基酶的异源高效可溶性表达,为脱乙酰基酶的应用提供了基础
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