条斑紫菜高纯度藻红蛋白规模制备及光学性质研究

摘要 旨在大量制备条斑紫菜高纯度藻红蛋白并研究其光学性质。以江苏吕泗条斑紫菜为原料，采用“溶胀+ 组织捣碎” 法破碎2 kg 冻干条斑紫菜叶状体细胞，经多次硫酸铵盐析和一次羟基磷灰石层析后获得纯度＞ 3.20 的藻红蛋白的产率为0.184%， 再经一次同样层析可获得纯度＞ 4.50 的藻红蛋白的产率为0.109%。蛋白纯度已通过吸收/ 荧光激发光谱，十二烷基硫酸钠- 聚丙 烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）/ 非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳（Native-PAGE）的考马斯亮蓝/ 醋酸锌双染验证。该蛋白摩尔消光系 数经Folin-酚法和Bradford 法测定分别为1.79 mL/（mg?cm）和1.73 mL/（mg?cm），20℃时在505 nm 处的荧光量子产率为0.90， 在日光灯、发光二极管、碘钨灯和激光4 种光源下的光漂白效果以激光最显著，240 μg/mL 藻红蛋白10 min 可接近碘钨灯辐照240 min 的光漂白率