抗金黄色葡萄球菌单链抗体（scFv）的原核表达及蛋白纯化

摘要 旨在将来源于鸡的金黄色葡萄球菌单链抗体（scFv）进行原核诱导表达,获得有抗体活性的目的蛋白。构建含有目的抗体基因的重组质粒,将此质粒进行原核诱导表达并鉴定所获得蛋白的生物活性。结果显示,（1）成功构建了含有金黄色葡萄球菌单链抗体（scFv）的重组质粒pCold I-scFv,质粒成功转化到大肠杆菌表达菌株中;（2）经过诱导表达后,目的蛋白主要以包涵体的形式存在于沉淀中;（3）使用4 mol/L 尿素成功地将包涵体变性溶出;（4）通过柱层析法及透析法获得了纯化及复性效果较好的目的蛋白;（5）间接ELISA鉴定证实所获蛋白具有金黄色葡糖球菌抗体活性。通过质粒构建及原核诱导表达、包涵体溶出和复性等步骤,最终获得了有金黄色葡萄球菌抗体活性的目的蛋白