%0 Journal Article %T 抗金黄色葡萄球菌单链抗体(scFv)的原核表达及蛋白纯化 %A 徐永平 %A 李媛 %A 李晓宇 %A 王丽丽 %A 王熙涛 %A 李晶泉 %J - %D 2016 %R 10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2016.11.022 %X 摘要 旨在将来源于鸡的金黄色葡萄球菌单链抗体(scFv)进行原核诱导表达,获得有抗体活性的目的蛋白。构建含有目的抗体基因的重组质粒,将此质粒进行原核诱导表达并鉴定所获得蛋白的生物活性。结果显示,(1)成功构建了含有金黄色葡萄球菌单链抗体(scFv)的重组质粒pCold I-scFv,质粒成功转化到大肠杆菌表达菌株中;(2)经过诱导表达后,目的蛋白主要以包涵体的形式存在于沉淀中;(3)使用4 mol/L 尿素成功地将包涵体变性溶出;(4)通过柱层析法及透析法获得了纯化及复性效果较好的目的蛋白;(5)间接ELISA鉴定证实所获蛋白具有金黄色葡糖球菌抗体活性。通过质粒构建及原核诱导表达、包涵体溶出和复性等步骤,最终获得了有金黄色葡萄球菌抗体活性的目的蛋白 %K 可溶性表达 %K 包涵体 %K 蛋白纯化 %K 蛋白复性 %K 有活性的蛋白 %U http://journal03.magtech.org.cn/Jweb_swjstb/CN/abstract/abstract11332.shtml