盐藻小G蛋白DsRab的原核表达及纯化

摘要 前期对盐藻小G蛋白基因DsRab研究表明，在盐胁迫诱导下该基因转录水平明显提高。为进一步研究该蛋白在盐藻耐盐机制中的作用，PCR扩增DsRab的开放阅读框(ORF)，并将其克隆至带有GST标签的原核表达载体pGS-21a，得到重组表达载体pGS-21a-DsRab。将重组表达载体转化E. coli BL21(DE3)，IPTG诱导表达，并优化诱导表达条件，利用GST-SefinoseTM Kit进行纯化，用SDS-PAGE和Western blot鉴定。结果表明，成功构建了重组表达载体pGS-21a-DsRab，SDS-PAGE结果显示得到的蛋白与预期分子量相符，并且纯度较高；Western blot检测结果初步证明该融合蛋白为GST-DsRab