药用级微生物谷氨酰胺转胺酶的纯化工艺研究

为了提高谷氨酰胺转胺酶的纯度和扩展在医药领域的应用，探索了一种适合工业化生产的、安全高效的微生物谷氨酰胺转胺酶纯化方法。轮枝链霉菌发酵后，经离心10 000 r/min 4℃除去菌体，调节发酵液电导率至4.1mS/cm和pH6.0后，以直线流速60cm/h通过SP Sepharose FF阳离子交换层析柱对目的蛋白高 选择性和高载量地捕获，再通过phenyl sepharose 6 FF（high sub）疏水层析柱进行精细纯化。纯化后经SDS-PAGE鉴定纯度达到95%以上，HPLC分析纯度> 99%。鲎试剂测定内毒素含量为0.013EU/ml，达到中国药典中血制品要求的低于0.15EU/ml标准