%0 Journal Article %T 药用级微生物谷氨酰胺转胺酶的纯化工艺研究 %A 常忠义 %A 张伟 %A 李博 %A 步国建 %A 裴正培 %A 金明飞 %A 高红亮 %A 鲁伟 %J - %D 2014 %R 10.13523/j.cb.20140409 %X 为了提高谷氨酰胺转胺酶的纯度和扩展在医药领域的应用,探索了一种适合工业化生产的、安全高效的微生物谷氨酰胺转胺酶纯化方法。轮枝链霉菌发酵后,经离心10 000 r/min 4℃除去菌体,调节发酵液电导率至4.1mS/cm和pH6.0后,以直线流速60cm/h通过SP Sepharose FF阳离子交换层析柱对目的蛋白高 选择性和高载量地捕获,再通过phenyl sepharose 6 FF(high sub)疏水层析柱进行精细纯化。纯化后经SDS-PAGE鉴定纯度达到95%以上,HPLC分析纯度> 99%。鲎试剂测定内毒素含量为0.013EU/ml,达到中国药典中血制品要求的低于0.15EU/ml标准 %K 谷氨酰胺转胺酶 %K 离子交换层析 %K 疏水层析 %K 纯化 %U http://manu60.magtech.com.cn/biotech/CN/abstract/abstract5704.shtml