研究报告重组Ⅱ型登革病毒NS1的表达及其免疫原性的研究

目的：表达制备重组Ⅱ型登革病毒非结构蛋白NS1，检测该重组表达蛋白的免疫原性，为检测试剂盒的研制提供基础。方法：根据Ⅱ型登革病毒NS1蛋白基因序列（GenBank 登录号：NC_001474），对基因序列进行编码密码子优化后进行全基因合成，随后，经双酶切将目的片段克隆到表达载体pET28a上，通过IPTG诱导表达；表达产物经Western blot鉴定后，进一步进行蛋白纯化和透析复性，制备获得重组Ⅱ型登革病毒NS1蛋白。收获的NS1蛋白免疫小鼠，制备多克隆抗体，通过间接酶联免疫学方法测定其效价，检测其免疫原性。结果：成功构建了Ⅱ型登革病毒NS1蛋白的表达载体。Western blot显示表达的重组蛋白能够被NS1单抗特异性的结合，纯化复性后的重组蛋白在小鼠体内表现出良好的免疫原性。结论：重组表达的NS1蛋白有良好的免疫原性，为以后的NS1单克隆抗体的制备和登革病毒检测试剂盒的研制提供了良好的基础