%0 Journal Article %T 研究报告重组Ⅱ型登革病毒NS1的表达及其免疫原性的研究 %A 付娟娟 %A 孙强明 %A 李多 %A 杨丽娟 %A 潘玥 %A 赵玉娇 %A 邱丽娟 %A 陈俊英 %A 黄新伟 %J - %D 2014 %R 10.13523/j.cb.20140902 %X 目的:表达制备重组Ⅱ型登革病毒非结构蛋白NS1,检测该重组表达蛋白的免疫原性,为检测试剂盒的研制提供基础。方法:根据Ⅱ型登革病毒NS1蛋白基因序列(GenBank 登录号:NC_001474),对基因序列进行编码密码子优化后进行全基因合成,随后,经双酶切将目的片段克隆到表达载体pET28a上,通过IPTG诱导表达;表达产物经Western blot鉴定后,进一步进行蛋白纯化和透析复性,制备获得重组Ⅱ型登革病毒NS1蛋白。收获的NS1蛋白免疫小鼠,制备多克隆抗体,通过间接酶联免疫学方法测定其效价,检测其免疫原性。结果:成功构建了Ⅱ型登革病毒NS1蛋白的表达载体。Western blot显示表达的重组蛋白能够被NS1单抗特异性的结合,纯化复性后的重组蛋白在小鼠体内表现出良好的免疫原性。结论:重组表达的NS1蛋白有良好的免疫原性,为以后的NS1单克隆抗体的制备和登革病毒检测试剂盒的研制提供了良好的基础 %K 登革病毒 %K 重组蛋白 %K NS1蛋白 %K 免疫原性 %K ELISA %U http://manu60.magtech.com.cn/biotech/CN/abstract/abstract5771.shtml