Karboksilesteraza djelomice hidrolizira estere gama-butirobetaina u serumu ？takora

Sa？etak Premda su poznati ve？ neko vrijeme, esteri gama-butirobetaina (GBB) i srodni spojevi nisu dobili mnogo pozornosti u znanstvenoistra？iva？koj zajednici, a njihova fiziolo？ka funkcija i dalje je nerazja？njena. U ranijem smo istra？ivanju HPLC-metodom otkrili enzimsku aktivnost GBB-esteraze u serumu ？takora rabe？i umjetni supstrat ovoga enzima, tj. fenilirani gama-butirobetain. Cilj ovoga istra？ivanja bio je razviti pretragu koja ？e omogu？iti spektrofotometrijsko ili kolorimetrijsko odre？ivanje reakcijskih produkata nastalih aktivno？？u GBB-esteraze te utvrditi koji pojedina？ni proteini u serumu ？takora posjeduju aktivnost GBB-esteraze. U tu je svrhu sintetiziran gama-butirobetain 1-naftil ester. Njegovom hidrolizom otpu？ta se 1-naftol koji pove？ava opti？ku apsorbanciju na 322 nm. Pokazali smo da u hidrolizi GBB 1-naftil estera u 1-naftol u serumu ？takora sudjeluje GBB-esteraza. Poku？ali smo pro？istiti enzim iz ？takorskoga seruma. Kombinacijom DEAE sefaroze pri pH 4,2 i afinitetne kromatografije s prokainamidom dobili smo 68-erostruko pove？anje aktivnosti ovoga enzima. Razdvajanjem bjelan？evina iz frakcije s pomo？u 2D elektroforeze te naknadnom spektrometrijom masa utvr？eno je da u serumu ？takora esteraznu aktivnost prema gama-butirobetainu kao supstratu djelomice provodi karboksilesteraza