%0 Journal Article %T Karboksilesteraza djelomice hidrolizira estere gama-butirobetaina u serumu £¿takora %A Bagdonien¨¦ %A Lida %A Borutinskait£¿ %A Veronika %A Juodka %A Benediktas %A Kalvi£¿£¿ %A Ivars %A Labeikyt£¿ %A Danut£¿ %A Prokofjevs %A Aleksandrs %A Sjakste %A Nikolajs %A Trapencieris %A P¨¥teris %J - %D 2009 %R 10.2478/10004-1254-60-2009-1915 %X Sa£¿etak Premda su poznati ve£¿ neko vrijeme, esteri gama-butirobetaina (GBB) i srodni spojevi nisu dobili mnogo pozornosti u znanstvenoistra£¿iva£¿koj zajednici, a njihova fiziolo£¿ka funkcija i dalje je nerazja£¿njena. U ranijem smo istra£¿ivanju HPLC-metodom otkrili enzimsku aktivnost GBB-esteraze u serumu £¿takora rabe£¿i umjetni supstrat ovoga enzima, tj. fenilirani gama-butirobetain. Cilj ovoga istra£¿ivanja bio je razviti pretragu koja £¿e omogu£¿iti spektrofotometrijsko ili kolorimetrijsko odre£¿ivanje reakcijskih produkata nastalih aktivno£¿£¿u GBB-esteraze te utvrditi koji pojedina£¿ni proteini u serumu £¿takora posjeduju aktivnost GBB-esteraze. U tu je svrhu sintetiziran gama-butirobetain 1-naftil ester. Njegovom hidrolizom otpu£¿ta se 1-naftol koji pove£¿ava opti£¿ku apsorbanciju na 322 nm. Pokazali smo da u hidrolizi GBB 1-naftil estera u 1-naftol u serumu £¿takora sudjeluje GBB-esteraza. Poku£¿ali smo pro£¿istiti enzim iz £¿takorskoga seruma. Kombinacijom DEAE sefaroze pri pH 4,2 i afinitetne kromatografije s prokainamidom dobili smo 68-erostruko pove£¿anje aktivnosti ovoga enzima. Razdvajanjem bjelan£¿evina iz frakcije s pomo£¿u 2D elektroforeze te naknadnom spektrometrijom masa utvr£¿eno je da u serumu £¿takora esteraznu aktivnost prema gama-butirobetainu kao supstratu djelomice provodi karboksilesteraza %K 2D elektroforeza %K HPLC %K kolorimetrija %K 1-naftol %K spektrofotometrija %U https://hrcak.srce.hr/index.php?show=clanak&id_clanak_jezik=60352