当归苯丙氨酸解氨酶基因原核表达载体的构建

目的 构建当归苯丙氨酸解氨酶（ PAL ）基因原核表达载体，为重组蛋白的异源表达奠定基础。 方法 以PAL基因的全长cDNA序列为模板，PCR扩增得到PAL基因的开放阅读框序列，利用双酶切、酶连技术构建原核表达载体pGEX-4T-3-PAL，转化大肠杆菌（E.coli）BL21（DE3）感受态细胞，筛选阳性克隆菌株。 结果 利用传统的酶切和连接的方法成功构建了PAL基因的原核表达载体，并筛选得到阳性大肠杆菌表达菌。 结论 初步证明传统的酶切和连接技术能够运用于PAL基因原核表达载体的构建，获得的原核表达菌株用于下一步PAL蛋白的表达研究