%0 Journal Article %T 当归苯丙氨酸解氨酶基因原核表达载体的构建 %A 杨彩霞 %A 杨雪 %A 王引权 %A 雒军 %J 甘肃中医药大学学报 %D 2018 %R 10.16841/j.issn1003-8450.2018.03.01 %X 目的 构建当归苯丙氨酸解氨酶( PAL )基因原核表达载体,为重组蛋白的异源表达奠定基础。 方法 以PAL基因的全长cDNA序列为模板,PCR扩增得到PAL基因的开放阅读框序列,利用双酶切、酶连技术构建原核表达载体pGEX-4T-3-PAL,转化大肠杆菌(E.coli)BL21(DE3)感受态细胞,筛选阳性克隆菌株。 结果 利用传统的酶切和连接的方法成功构建了PAL基因的原核表达载体,并筛选得到阳性大肠杆菌表达菌。 结论 初步证明传统的酶切和连接技术能够运用于PAL基因原核表达载体的构建,获得的原核表达菌株用于下一步PAL蛋白的表达研究 %K 当归 %K 苯丙氨酸解氨酶基因 %K 载体构建 %K 原核表达 %U http://gszyxyxb.gszy.edu.cn/oa/darticle.aspx?type=view&id=20180301