肺炎克雷伯杆菌表达吡咯喹啉醌依赖性聚乙烯醇脱氢酶 钟杉杉1;刘辉2;葛喜珍3;田平芳1

聚乙烯醇脱氢酶（PVADH）是降解聚乙烯醇（PVA）的关键酶，大肠杆菌或毕赤酵母生产PVADH需额外添加辅酶吡咯喹啉醌（PQQ）才具活性。为了降低添加PQQ的成本，在PQQ天然生产菌肺炎克雷伯杆菌（Klebsiella pneumoniae）中表达全酶PQQ-PVADH。首先通过外源基因密码子优化实现PVADH的高效表达，PVADH酶活达到45 U/mL；进而通过辅酶再生提高PQQ产量，双质粒重组菌Kp（pvadh+pqq）的PVADH酶活达到68 U/mL；最后经发酵优化，PVADH酶活达到81 U/mL，为PQQ-PVADH的生产提供了另一种选择方案。