%0 Journal Article %T 肺炎克雷伯杆菌表达吡咯喹啉醌依赖性聚乙烯醇脱氢酶 钟杉杉1;刘辉2;葛喜珍3;田平芳1 %A 孙忠义 %A 田平芳 %A 赵鹏 %A 弥志伟 %J 北京化工大学学报(自然科学版) %D 2019 %R 10.13543/j.bhxbzr.2019.05.007 %X 聚乙烯醇脱氢酶(PVADH)是降解聚乙烯醇(PVA)的关键酶,大肠杆菌或毕赤酵母生产PVADH需额外添加辅酶吡咯喹啉醌(PQQ)才具活性。为了降低添加PQQ的成本,在PQQ天然生产菌肺炎克雷伯杆菌(Klebsiella pneumoniae)中表达全酶PQQ-PVADH。首先通过外源基因密码子优化实现PVADH的高效表达,PVADH酶活达到45 U/mL;进而通过辅酶再生提高PQQ产量,双质粒重组菌Kp(pvadh+pqq)的PVADH酶活达到68 U/mL;最后经发酵优化,PVADH酶活达到81 U/mL,为PQQ-PVADH的生产提供了另一种选择方案。 %K 聚乙烯醇脱氢酶 %K 肺炎克雷伯杆菌 %K 吡咯喹啉醌 %K 辅酶再生 %U http://www.journal.buct.edu.cn/CN/abstract/abstract15843.shtml