柱前衍生化HPLC法测定酵母细胞壁中的甘露聚糖与β-葡聚糖

采用1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP) 为柱前衍生化试剂，结合反相高效液相色谱法，建立了同时测定酵母细胞壁中甘露聚糖和β-葡聚糖的方法。样品中的多聚糖经盐酸高温水解得到甘露糖和葡萄糖，经PMP衍生后，以0.02 mol/L乙酸铵-乙腈(80.5∶19.5)为流动相等度洗脱，反相C18柱(4.6 mm×250 mm，5 μm)分离，紫外检测器(波长250 nm)检测，所测2种单糖的含量通过换算后得到甘露聚糖和β 葡聚糖的含量。结果表明，甘露糖和葡萄糖在10.0~1 000 mg/L质量浓度范围内与对应峰面积呈良好的线性关系，相关系数(r2)大于0.999。样品在28.0~80.0 mg范围内加标水平的平均回收率为88.1% ~91.0%，相对标准偏差(RSD)小于3%，甘露糖和葡萄糖的检出限(LOD)分别为0.10 mg/L和0.08 mg/L。该方法灵敏度高、准确性好、实用可靠，适用于酵母细胞壁样品中甘露聚糖和β-葡聚糖含量的分析测定