补阳还五汤稳定ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化易损斑块的作用机制

目的：探究补阳还五汤（BYHWT）对高脂饮食的载脂蛋白E敲除（ApoE-/-）小鼠动脉粥样硬化（atherosclerosis，AS）易损斑块的影响及其相关的作用机制。方法：8周龄ApoE-/-小鼠高脂饮食喂养12周复制AS易损斑块模型，以C57/BL-6J小鼠作为正常组给于正常饮食饮水。随机取4只小鼠中头臂动脉与主动脉弓制作病理切片，通过计算斑块面积及其易损指数判定模型复制成功。72只ApoE-/-小鼠随机分为6组，分别为正常组、模型组、自噬诱导剂组及BYHWT低、中、高剂量组，BYHWT低、中、高剂量组分别给予5，10，20 g·kg-1 BYHWT灌胃8周，自噬诱导剂组给予雷帕霉素4 mg·kg-1灌胃8周，正常组继续给于正常饮食饮水。8周后，小鼠处死，游离胸主动脉到腹主动脉末端，制备血管组织标本用于斑块的易损指数测定，采用逆转录聚合酶链式反应（RT-PCR）及蛋白免疫印迹法（Western blot）分析血管组织中自噬体形成。结果：ApoE-/-小鼠成功诱导AS易损斑块模型，模型组AS斑块形成明显，斑块易损指数显著大于正常组（P<0.01）；补阳还五汤各剂量组明显缩小斑块面积，易损指数与模型组比较有不同程度的降低（P<0.05）。模型组斑块血管组织中基质金属蛋白酶（MMP）-1，2，3 mRNA水平明显高于正常组；与模型组比较，补阳还五汤、雷帕霉素组的MMP-1，2，3 mRNA的水平明显降低（P<0.05，P<0.01）；与正常组比较，模型组的微管轻链蛋白3（LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ）含量显著降低，高、中、低剂量的补阳还五汤及其雷帕霉素组可以明显升高LC3-Ⅱ/LC-Ⅰ含量（P<0.05）。结论：补阳还五汤具有缩小AS斑块面积、降低血管中的基质金属蛋白酶的表达，调节斑块内巨噬细胞自噬从而降低斑块的易损指数，提高AS斑块的稳定性的作用