大米α-球蛋白的原核表达、抗体制备及检测

大米α-球蛋白是大米胚乳中主要的盐溶蛋白，也是大米的主要致敏原之一。为了建立起大米α-球蛋白的检测分析方法，将大米α-球蛋白的编码基因亚克隆到表达载体pQE30中，并在大肠杆菌中进行了重组大米α-球蛋白的表达。通过金属亲和层析法对重组大米α-球蛋白进行纯化，以纯化的重组大米α-球蛋白为抗原免疫白兔，制备出了抗大米α-球蛋白多克隆抗体。Western Blotting 检测结果显示，该抗体能够特异性地与大米α-球蛋白进行免疫结合反应，抗大米α-球蛋白抗体与目标蛋白的结合呈现出一定的定量关系。并且，利用该抗体构建起了大米α-球蛋白的 ELISA检测分析方法，并对3种大米样品中α-球蛋白的含量进行了检测分析