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ISSN: 2333-9721
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-  2017 

稳定表达人乳头瘤病毒 58 型(HPV58)E6E7 融合基因的人宫颈癌细胞株 C33A 的构建及验证

DOI: doi:10.7507/1001-5515.201605040

Keywords: 人乳头瘤病毒 58 型, E6E7基因, 稳定转染, 人宫颈癌 C33A 细胞

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Abstract:

为构建稳定表达人乳头瘤病毒(HPV)58 型 E6E7 融合基因的人宫颈癌 C33A 细胞系,将实验前期构建好并实现真核表达的重组慢病毒颗粒 LV-HPV58E6E7 转染入 HPV(–)的人宫颈癌 C33A 细胞,经流式细胞仪分选出稳定转染的阳性克隆,利用四唑盐比色(MTT)法检测转染后细胞的生长情况以及流式细胞术检测细胞周期,并将稳定表达 HPV58E6E7 融合基因的 C33A 细胞 LV-HPV58E6E7/C33A 接种于裸鼠左腋下成瘤,用荧光定量 PCR(qRT-PCR)、Western blot 检测瘤组织中 HPV58 型 E6E7 融合基因的转录和表达。结果显示 HPV58E6E7 融合基因可促进 C33A 细胞的增殖;LV-HPV58E6E7/C33A 细胞株能在裸鼠体内稳定转录及表达 HPV58 型 E6E7 融合基因。这表明我们成功建立了能稳定表达 HPV58E6E7 融合基因的人宫颈癌 C33A 细胞系 LV-HPV58E6E7/C33A,为 HPV58 型治疗性疫苗的免疫效果检测提供了抗原细胞来源

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