自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤增强鼻咽癌细胞对放射和化学治疗的敏感性
Autophagy inhibitor 3-methyladenine enhances the sensitivity of nasopharyngeal carcinoma cells to chemotherapy and radiotherapy

目的：探讨自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-methyladenine，3-MA)增强鼻咽癌细胞对放射治疗(放疗)和化学治疗(化疗)敏感性的作用及其相关的分子机制。方法：采用MTT法检测3-MA对细胞的增殖抑制作用；集落克隆形成法检测3-MA对细胞集落克隆形成的影响；Annexin V/PI双染法、线粒体膜电位检测试剂盒(JC-1)、DAPI染色检测细胞凋亡；Western 印迹检测内质网应激相关蛋白葡萄糖调节蛋白78(glucose-regulated protein 78，GRP78)、自噬相关蛋白beclin1和微管相关蛋白1轻链3(microtubule-associated protein 1 light chain 3，LC3)表达。结果：不同体积浓度或剂量的顺铂(cisplatin，DDP)、电离辐射(ionizing radiation，IR)、衣霉素(tunicamycin，TM)、3-MA对鼻咽癌细胞HONE-1均具有增殖抑制作用，且随着体积浓度或剂量的增加和作用时间的延长，对HONE-1细胞增殖抑制作用随之增加。经1.00 mmol/L 3-MA预处理细胞后，再次给予6.00 μmol/L DDP，4.00 Gy IR，1.00 μmol/L TM处理，细胞存活率明显降低，均低于单用组，与空白对照组比较差异均有统计学意义(P<0.05)。3-MA增强DDP，IR，TM抑制细胞集落克隆形成作用。用6.00 μmol/L DDP或4.00 Gy IR处理HONE-1细胞24 h后，细胞凋亡率分别为5.8%和6.7%，与阴性对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。JC-1和DAPI染色显示3-MA增强DDP，IR或TM诱导的细胞凋亡作用；Western 印迹结果显示DDP，IR或TM处理组GRP78，beclin1表达呈时间依赖性上调，LC3 I向LC3 II转化，3-MA预处理组beclin1表达明显降低，LC3 I向LC3 II的转化。结论：自噬抑制剂3-MA可增强鼻咽癌细胞对放化疗的敏感性，其机制可能与3-MA抑制内质网应激诱导的自噬所产生的保护作用相关