人参皂苷β-葡萄糖苷酶基因的毕赤酵母载体构建及生物转化

摘要 将人参皂苷β-葡萄糖苷酶（GluGF）基因与表达载体pPIC9K连接，构建重组质粒，转化至毕赤酵母中表达，并用于人参皂苷Rb1的催化转化.研究结果表明，成功构建了重组表达质粒pPIC9K-GluGF，转化后筛选到阳性重组毕赤酵母菌.重组菌产酶的最佳甲醇诱导体积为0.5%，诱导时间为168 h.重组菌诱导培养制备的粗酶液具有GluGF的活性，可以水解人参皂苷Rb1，产物中皂苷C-K含量达到0.09 mg/mL，粗酶液中GluGF的比活力为0.67 U/mg