t20n点突变对水稻osracd蛋白gtp酶活性的影响

osracd是水稻小gtp结合蛋白rho家族成员，其功能之一是作为“分子开关”，通过控制花粉管的延伸生长，参与光敏核不育水稻光周期的育性转换。在序列同源性比对和蛋白保守结构域分析的基础上，采用重叠延伸pcr方法在水稻osracd基因的第一个高度保守的基序g1区引入t20n点突变，模拟gdp结合形式的osracd。进一步构建了与组氨酸标签融合的原核表达载体，原核表达和纯化了野生型和突变型osracd蛋白，并通过westernblot证实了融合蛋白表达和纯化的正确性。纯化蛋白的gtp酶活性检测结果显示，突变后的osracd蛋白gtp水解活性显著降低，提示osracd在t20n突变前后具有不同的生化特性。