%0 Journal Article %T t20n点突变对水稻osracd蛋白gtp酶活性的影响 %A 刘肖飞 %A 梁卫红** %J 中国生物工程杂志 %D 2010 %X osracd是水稻小gtp结合蛋白rho家族成员,其功能之一是作为“分子开关”,通过控制花粉管的延伸生长,参与光敏核不育水稻光周期的育性转换。在序列同源性比对和蛋白保守结构域分析的基础上,采用重叠延伸pcr方法在水稻osracd基因的第一个高度保守的基序g1区引入t20n点突变,模拟gdp结合形式的osracd。进一步构建了与组氨酸标签融合的原核表达载体,原核表达和纯化了野生型和突变型osracd蛋白,并通过westernblot证实了融合蛋白表达和纯化的正确性。纯化蛋白的gtp酶活性检测结果显示,突变后的osracd蛋白gtp水解活性显著降低,提示osracd在t20n突变前后具有不同的生化特性。 %K osracd %K 点突变 %K 原核表达和纯化 %K gtp酶活性 %U http://159.226.100.150:8082/biotech/CN/abstract/abstract12227.shtml