狂犬病病毒糖蛋白哺乳动物细胞稳定表达细胞系建立

试验首先根据genbank上所发表的狂犬病病毒cvs-24株糖蛋白基因序列，设计并合成一对特异性引物，通过反转录聚合酶链式反应（rt-pcr），获得糖蛋白全长cdna，连接在pmd18-t载体上，测序证明克隆的正确性后，将其插入真核表达载体pires1neo，构建了糖蛋白单一表达载体picg，表达质粒通过脂质体转染bhk-21细胞，在g418抗性压力下出现细胞克隆，通过pcr检测，确定启动子与糖蛋白基因在细胞基因组中共同整合。借助westernblot检测，证明所表达的糖蛋白与狂犬病抗血清有特异的反应性。采用间接elisa法，筛选出3株高效表达糖蛋白的细胞株，分别命名为icg1、icg2、icg3。