%0 Journal Article %T 狂犬病病毒糖蛋白哺乳动物细胞稳定表达细胞系建立 %A 于恒智 %A 张守峰 %A 扈荣良 %A 张乐萃 %J 中国生物工程杂志 %D 2009 %X 试验首先根据genbank上所发表的狂犬病病毒cvs-24株糖蛋白基因序列,设计并合成一对特异性引物,通过反转录聚合酶链式反应(rt-pcr),获得糖蛋白全长cdna,连接在pmd18-t载体上,测序证明克隆的正确性后,将其插入真核表达载体pires1neo,构建了糖蛋白单一表达载体picg,表达质粒通过脂质体转染bhk-21细胞,在g418抗性压力下出现细胞克隆,通过pcr检测,确定启动子与糖蛋白基因在细胞基因组中共同整合。借助westernblot检测,证明所表达的糖蛋白与狂犬病抗血清有特异的反应性。采用间接elisa法,筛选出3株高效表达糖蛋白的细胞株,分别命名为icg1、icg2、icg3。 %K 转染 %K 稳定表达 %K 狂犬病病毒 %K 糖蛋白 %K 转染 %K 稳定表达 %K 狂犬病病毒 %K 糖蛋白 %U http://159.226.100.150:8082/biotech/CN/abstract/abstract11971.shtml