一种高效构建同源重组dna片段的方法——融合pcr

融合pcr技术（fusionpcr）采用具有互补末端的引物，形成具有重叠链的pcr产物，通过pcr产物重叠链的延伸，从而将不同来源的任意dna片段连接起来，此技术在不需要内切酶消化和连接酶处理的条件下实现dna片段的体外连接，为同源重组片段的构建提供了快速简捷的途径。对原有的融合pcr技术进行改进，以三个同源重组线性dna片段的构建为例，详细论述了改进的融合pcr技术的反应过程及技术体系。结果表明，改进的融合pcr技术可以同时进行三个片段及四个片段的融合反应，产物长度均在4.5kb以上，各同源重组片段在扩增过程中均无突变发生，获得的片段可以用于后续实验分析。