%0 Journal Article %T 一种高效构建同源重组dna片段的方法——融合pcr %A 李敏 %A 杨谦 %J 中国生物工程杂志 %D 2007 %X 融合pcr技术(fusionpcr)采用具有互补末端的引物,形成具有重叠链的pcr产物,通过pcr产物重叠链的延伸,从而将不同来源的任意dna片段连接起来,此技术在不需要内切酶消化和连接酶处理的条件下实现dna片段的体外连接,为同源重组片段的构建提供了快速简捷的途径。对原有的融合pcr技术进行改进,以三个同源重组线性dna片段的构建为例,详细论述了改进的融合pcr技术的反应过程及技术体系。结果表明,改进的融合pcr技术可以同时进行三个片段及四个片段的融合反应,产物长度均在4.5kb以上,各同源重组片段在扩增过程中均无突变发生,获得的片段可以用于后续实验分析。 %K 融合pcr %K 重组片段 %K 同源臂 %K 抗性基因 %U http://159.226.100.150:8082/biotech/CN/abstract/abstract11437.shtml