人stnfr1基因的克隆、融合表达与生物学活性

采用rt-pcr，从hela细胞的mrna中扩增人stnfr1基因，构建含有目的片段的t载体克隆及原核表达载体pmal-c2x重组质粒亚克隆，转化入大肠杆菌，测序证实其序列与基因数据库中stnfr1基因一致。经异丙基-β-d半乳糖苷酶（iptg）诱导表达，淀粉树脂亲和层析法纯化，得到融合蛋白stnfr1-mbp。结果显示：经western-blotting检测，stnfr1-mbp具有免疫活性；mtt检测目的蛋白可有效地封闭tnfα对qsg7701的细胞毒性作用；流式细胞术检测目的蛋白对tnf-α诱导qsg7701凋亡有抑制作用；stnfr1-mbp具有良好的生物活性，为今后的研究打下了基础。