大豆油体与egf融合基因的克隆及其在红花种子中的表达

目的：旨在建立一种在红花油体中表达egf的转基因植物的方法。方法：通过pcr技术把大豆油体基因（ddoil）与egf构建成融合基因，克隆至植物表达载体pcambia1390r中，构建成植物表达载体p1390do-egf，然后转化进农杆菌lba4404中用于侵染红花外植体，通过甘露糖筛选培养基培养可获得红花转化苗。通过pcr、实时荧光相对定量rt-pcr、sds-page和westernblot分析目的基因的表达情况，通过mtt法检测egf的促细胞增殖活性。结果：pcr结果显示，红花叶片中能检测到egf基因；实时荧光相对定量rt-pcr结果显示，在红花种子中egf能成功实现转录；sds-page和westernblot检测证明，在转基因红花种子中能有效表达出egf，并具有其原有的免疫原性，mtt法实验结果表明egf具有促进balb/c3t3细胞增殖的生物活性。结论：大豆油体和egf融合基因已经成功转化进红花细胞的基因组中，并实现了egf外源蛋白在红花种子油体中的表达，为egf蛋白的产业化生产探讨了一种新的生产途径。