%0 Journal Article %T 大豆油体与egf融合基因的克隆及其在红花种子中的表达 %A 庞实锋 %A 姜潮 %A 李文荣 %A 冯治国 %A 刘敏 %A 楚生辉 %A 李校堃 %A 郑克勤 %J 中国生物工程杂志 %D 2014 %X 目的:旨在建立一种在红花油体中表达egf的转基因植物的方法。方法:通过pcr技术把大豆油体基因(ddoil)与egf构建成融合基因,克隆至植物表达载体pcambia1390r中,构建成植物表达载体p1390do-egf,然后转化进农杆菌lba4404中用于侵染红花外植体,通过甘露糖筛选培养基培养可获得红花转化苗。通过pcr、实时荧光相对定量rt-pcr、sds-page和westernblot分析目的基因的表达情况,通过mtt法检测egf的促细胞增殖活性。结果:pcr结果显示,红花叶片中能检测到egf基因;实时荧光相对定量rt-pcr结果显示,在红花种子中egf能成功实现转录;sds-page和westernblot检测证明,在转基因红花种子中能有效表达出egf,并具有其原有的免疫原性,mtt法实验结果表明egf具有促进balb/c3t3细胞增殖的生物活性。结论:大豆油体和egf融合基因已经成功转化进红花细胞的基因组中,并实现了egf外源蛋白在红花种子油体中的表达,为egf蛋白的产业化生产探讨了一种新的生产途径。 %K 油体 %K 表皮生长因子 %K 转基因红花 %K 融合基因 %U http://159.226.100.150:8082/biotech/CN/abstract/abstract16285.shtml