flt-1启动子在血管内皮细胞中特异生物活性的检测及其意义？

目的:构建带有组织特异性flt-1启动子的真核表达载体，检测其在转染的人脐静脉内皮细胞（huvec）中对荧光素酶报告基因表达的驱动能力。方法：采用pcr扩增flt-1启动子，插入到pgl3-basic-luc载体中，构建携带flt-1启动子的真核表达载体pgl3-flt-basic-luc，经脂质体法转染huvec、hepg2、nih3t3和hek293细胞，于转染48h后采用双荧光报告系统检测荧光素酶表达活性。结果:酶切及测序证实构建的pgl3-flt-basic-luc载体中含有序列正确的flt-1基因启动子，双荧光报告系统检测显示，转染的huvec细胞其荧光素酶活性明显高于hek293细胞（p<0.01），而转染的hepg2和nih3t3细胞中未检测出荧光素酶表达。结论:克隆的flt-1启动子具有较高的血管内皮特异性转录活性，可作为血管疾病靶向基因治疗的启动子来源。图